Fortune 1000 ialah kedudukan tahunan bagi 1000 syarikat awam terbesar di Amerika Syarikat, yang disusun dan diterbitkan oleh majalah Fortune. Senarai ini berfungsi sebagai penanda aras menyeluruh bagi sektor perniagaan Amerika dengan mengenal pasti firma-firma teratas berdasarkan jumlah hasil yang dijana daripada operasi teras, subsidiari disatukan, dan operasi terdiskaun.
Untuk dimasukkan ke dalam senarai ini, syarikat mestilah didagangkan secara awam dan menyediakan penyata kewangan penuh bagi sekurang-kurangnya tiga suku tahun fiskal. Syarikat swasta dikecualikan kerana mereka biasanya tidak mendedahkan data kewangan yang diperlukan. Senarai ini bersifat dinamik, mencerminkan perubahan dalam ekonomi, seperti penggabungan dan pengambilalihan, yang boleh menyebabkan syarikat masuk atau keluar daripada kedudukan tersebut setiap tahun.
Pelabur sering menggunakan Fortune 1000 untuk menjejaki prestasi perbadanan utama A.S. Walaupun Fortune 500 mewakili separuh teratas kumpulan ini, senarai penuh 1000 memberikan pandangan yang lebih luas tentang pasaran. Bagi mereka yang mencari pendedahan yang lebih luas kepada entiti besar ini, sesetengah pelabur melihat kepada indeks seperti Russell 3000, yang menggabungkan firma-firma penjana hasil tertinggi ini.